Genetic traceability of Staphylococcus aureus strains isolated from primiparous dairy cows mastitis, humans and environment in the Northeast region of Brazil / Rastreabilidade genética de cepas de Staphylococcus aureus isoladas de mastite de vacas primíparas, ordenhadores e ambiente de ordenha na região Nordeste do Brasil

ABSTRACT: This research aimed to investigate the genotypic relatedness of 18 Staphylococcus aureus strains isolated from intramammary infections in primiparous cows and extramammary sites on five dairy herds by rep-PCR using RW3A primers, and by PFGE using the endonuclease SmaI. The isolates were also evaluated in vitro for the susceptibility against beta-lactam antimicrobials drugs (penicillin and oxacillin), considering that beta-lactams are frequently used for treating staphylococcal intrammamary infections. The rep-PCR typing was highly discriminatory (D value= 0.9804) and a total of 15 patterns were detected. The PFGE method was also highly discriminatory (D value= 0.9667) and a total of 13 patterns were observed. A total of 15 out of 18 (83%) isolates were resistant to penicillin and one out of 18 (6%) to oxacillin. In conclusion, these findings confirmed the occurrence of a high genetic diversity of S. aureus strains at the herds and the presence of clonally-related strains only at the same herd, emphasizing a variety of genotypic profiles among the isolates.

RESUMO: Objetivou-se com este estudo investigar a correlação genética de 18 cepas de Staphylococcus aureus isoladas de infecções intramamárias em vacas primíparas e de locais extramamários em cinco propriedades leiteiras através das técnicas de PCR por sequências palindrômicas extragênicas repetitivas (rep-PCR), usando iniciadores RW3A, e de eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE), usando a endonuclease SmaI. Os isolados também foram avaliados in vitro quanto à suscetibilidade aos antimicrobianos beta-lactâmicos (penicilina e oxacilina). A tipagem por rep-PCR foi altamente discriminatória (valor D = 0,9804) e um total de 15 padrões foram detectados. Os isolados de S. aureus foram agrupados em três grupos diferentes (A a C), com 80% de similaridade. A técnica de PFGE também foi altamente discriminatória (valor D = 0,9667) e um total de 13 padrões foi observado. A análise do dendrograma com um coeficiente de similaridade de 80% gerou dois grupos diferentes (A e B). Além disso, cepas clonais isoladas do leite foram identificadas na mesma propriedade pelos dois métodos de tipificação e, apesar da presença de cepas dominantes, nossos resultados sugerem uma alta diversidade genética dentre as cepas de S. aureus analisadas. Um total de 15, dos 18 (83%) isolados, eram resistentes à penicilina e um dos 18 (6%) à oxacilina. Assim, esses achados confirmam a ocorrência de uma alta diversidade genética de cepas de S. aureus nas propriedades e a presença de cepas clonalmente relacionadas apenas na mesma propriedade, enfatizando uma variedade de perfis genotípicos entre os isolados.

Pesquisa de Staphylococcus spp. em profissionais de ordenha de propriedades leiteiras no Estado de Pernambuco, Brasil / Search for Staphylococcus spp. in milkers of dairy farms in Pernambuco State, Brazil

A contaminação de ordenhadores por Staphylococcus spp. tem sido descrita como um fator de risco para infecções intramamárias em animais durante o procedimento de ordenha. Objetivou-se avaliar a colonização por Staphylococcus spp. da região palmar/interdigital e da cavidade nasal em funcionários de ordenha de propriedades leiteiras no Município de Venturosa-PE. Foram coletadas amostras de swab nasal e das mãos de funcionários (n=6) de três propriedades leiteiras. Em todas as amostras de swab nasal (6/6) e em 33,3% (2/6) de swab das mãos foram isolados Staphylococcus spp. Além disso, todos os isolados foram classificados como Staphylococcus Coagulase Negativo (SCN), o que indica a disseminação desses micro-organismos.

Occurrence of anti-Neospora caninum antibodies in cattle in the dairy farming region of the state of Piauí, Brazil / Ocorrência de anticorpos anti- Neospora caninum em vacas na bacia leiteira do estado do Piauí, Brasil

Abstract This study focused on the detection of anti-Neospora caninum IgG antibodies in cows in the dairy farming region of the state of Piauí, Brazil. To this end, serum samples were collected from 255 dairy cows on 17 farms located in the dairy farming region of the municipality of Parnaíba, Piauí, Brazil. The indirect fluorescence antibody test (IFAT) was employed to detect anti-N. caninum IgG antibodies, using anti-bovine IgG (Sigma®) conjugated to fluorescein isothiocyanate (FITC) and a cutoff point of 1:200. Of the 255 samples analyzed, 69 (27.06%) were positive for anti- N. caninum IgG antibodies, the relative frequency found by property was: 1 (20.00%), 2 (53.33%), 3 (46.66%), 4 (53.33%), 5 (26.66%), 6 (6.66%), 7 (6.66%), 8 (20.00%), 9 (26.66%), 10 (26.66%), 11 (20.00%), 12 (20.00%), 13 (46.66%), 14 (26.66%), 15 (26.66%), 16 (20.00%) and 17 (13.33%). with titers of 200 (15.94%), 400 (20.30%), 800 (24.63%), 1600 (23.18%) and 3200 (15.94%), being the highest frequency for the titer of 800. This study demonstrates for the first time that cows from dairy herds of Parnaíba municipality, state of Piauí, are exposed to N. caninum.

Resumo Objetivou-se estudar a ocorrência de anticorpos IgG anti- Neospora caninum em vacas, na bacia leiteira do estado do Piauí, Brasil. Foram obtidas amostras séricas de 255 vacas leiteiras provenientes de 17 propriedades localizadas na bacia leiteira do município de Parnaíba, Piauí, Brasil. Para a pesquisa de anticorpos IgG anti- N. caninum foi empregada a técnica de Reação de Imunofluorescência Indireta, utilizando-se conjugado anti-IgG bovine (Sigma®) conjugado ao isotiocianato de fluoresceína e ponto de corte 1:200. Das 255 amostras analisadas, 69 (27,06%) foram positivas para anticorpos IgG anti- N. caninum, a frequência relativa encontrada por propriedade foi de: 1 (20,00%), 2 (53,33%), 3 (46,66%), 4 (53,33%), 5 (26,66%), 6 (6,66%), 7 (6,66%), 8 (20,00%), 9 (26,66%) 10 (26,66%), 11 (20,00%), 12 (20,00%), 13 (46,66%), 14 (26,66%), 15 (26,66%), 16 (20,00%) e 17 (13,33%) com títulos de 200 (15,94%), 400 (20,30%), 800 (24,63%), 1600 (23,18%) e 3200 (15,94%), sendo a maior frequência para o título de 800. Este estudo demonstra pela primeira vez que, vacas de rebanhos leiteiros do município de Parnaíba, estado do Piauí, estão expostas ao N. caninum.

Risk factors and anti-Toxoplasma gondii and Neospora caninum antibody occurrence in dogs in João Pessoa, Paraíba state, Northeastern Brazil / Fatores de risco e ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e Neospora caninum em cães de João Pessoa, Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil

Abstract The aim of this study was to determine the occurrence of infections due to Toxoplasma gondii and Neospora caninum and corresponding risk factors among dogs attended at veterinary clinics in the city of João Pessoa, Paraíba, northeastern Brazil. Blood samples were collected from 384 dogs that were attended at 34 veterinary clinics between April 2015 and May 2016. These two agents were diagnosed through the indirect immunofluorescence reaction (IFAT). Among the 384 animals evaluated, 37 (9.6%) were positive for T. gondii, with titers ranging from 16 to 512. Six dogs (1.6%) were positive for N. caninum, with titers of 50 to 200. Access to the streets (OR = 4.60; 95% CI = 1.74-12.20) and environments close to forested areas (OR = 2.79; 95% CI = 1.32-5.93) were found to be risk factors for T. gondii infection. The dogs attended at veterinary clinics in João Pessoa are exposed to infections caused by T. gondii and N. caninum. Dog owners should avoid having access to the street or contact with forest environments.

Resumo O objetivo deste trabalho foi determinar a ocorrência e os fatores de risco das infecções por Toxoplasma gondii e Neospora caninum em cães atendidos em clínicas veterinárias da cidade de João Pessoa, Paraíba, Nordeste do Brasil. Foram colhidas 384 amostras de sangue cães procedentes de atendimento de 34 clínicas veterinárias, no período de abril de 2015 a maio de 2016. O diagnóstico para os dois agentes foi realizado pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI). Dos 384 animais avaliados 37 (9,6%) foram positivos para T. gondii com títulos variando de 16 a 512. Para N. caninum seis (1,6%) cães foram positivos com títulos de 50 a 200. Foram constatados como fatores de risco para T. gondii as variáveis acesso à rua (OR = 4,60; IC 95% = 1,74-12,20) e ambiente próximo a matas (OR= 2,79; IC 95% = 1,32-5,93). Os cães atendidos em clínicas veterinárias em João Pessoa estão expostos às infecções por T. gondii e N. caninum. Os proprietários devem evitar o acesso dos animais à rua ou o contato com ambientes florestais.

Occurrence of anti-Toxoplasma gondii antibodies and parasite DNA in backyard chicken breeding in Northeast, Brazil / Ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e DNA do parasita em galinhas de criações domésticas no Nordeste, Brasil

Abstract The aim of the present study was to investigate the occurrence of anti-Toxoplasma gondii antibodies and parasite DNA in backyard chickens bred in the metropolitan area of Recife, Brazil. In total, 212 serum samples were collected from 16 properties, and 12 backyard chickens were collected in the six sanitary districts of Recife. An indirect immunofluorescence assay (IFA) was used to investigate the occurrence of anti-Toxoplasma gondii antibodies. Polymerase chain reaction (PCR) was used to detect T. gondii DNA in brain, heart, liver and lung specimens. Of the samples analyzed by serology, 86/212 (40.56%) were positive; of the samples analyzed by PCR, 2/12 (16.7%) were positive, with both samples positive by both tests (serological and molecular). The presence of antibody anti-T. gondii and parasite DNA in tissues of these animals are worrying aspects for public health because there is a risk of transmission of the parasite to humans through eating undercooked or raw meat. Based on the results, the adoption of preventive measures to prevent the cats access to the chickens creations should be encouraged, since these animals were identified in most of the studied properties.

Resumo O objetivo do presente estudo foi investigar a ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e de DNA do parasito em galinhas de criações domésticas, na região metropolitana de Recife, Brasil. No total, 212 amostras de soro foram coletadas de aves de 16 estabelecimentos e de 12 galinhas de criações domésticas nos seis distritos sanitários de Recife. Para a pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii foi utilizada a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) foi utilizada para detectar o DNA de T. gondii em fragmentos de cérebro, coração, fígado e pulmão. Das amostras analisadas por sorologia, 86/212 (40,56%) foram positivas. Das amostras analisadas por PCR, 2/212 (16,7%) foram positivas, em ambos os testes (sorológicos e moleculares). A presença de anticorpos anti-T. gondii e de DNA parasitário nos tecidos desses animais são aspectos preocupantes para saúde pública, porque há o risco de transmissão do parasita para humanos através da ingestão de carne mal cozida ou crua. Com base nos resultados obtidos, a adoção de medidas preventivas que evitem o acesso de gatos às criações de galinhas deve ser incentivada, uma vez que esses animais foram identificados na maioria das propriedades estudadas.

Caracterização microbiológica de filés de merluza comercializados em supermercados do Recife, PE / Microbiological characterization of fishes fillets commercialized in supermarkets of Recife, PE

A merluza Merluccius hubbsi é uma espécie típica da Região Sudeste-Sul do Brasil de grande importância econômica e comercialização em forma de filé. Desta forma, objetivou-se avaliar a qualidade microbiológica de amostras de filés de merluza congelados provenientes de quatro redes de supermercados da cidade do Recife, com relação à contagem de estafilococos coagulase positiva, contagem de coliformes totais, termotolerantes e Salmonella spp, seguindo-se o método descrito pelo Ministério da Agricultura Pecuária e Abastecimento. Foi analisado um total de 24 amostras para as quais foram obtidas contagens variando de 1,9 x 10² a 2,2 x 10³ UFC/g e de 1,0 x 10² a 6,0 x 10² UFC/g respectivamente para estafilococos coagulase positiva e coliformes termotolerantes. Não foi constatada a presença de Salmonella. Diante dos resultados obtidos, conclui-se que as amostras, na sua grande maioria, estão aptas para o consumo.